От способности мононуклеарных фагоцитов удалять стимулы воспаления зависит исход воспалительной реакции: либо ее разрешение, либо прогрессирование с более выраженным проявлением заболевания. В области воспаления мононуклеарные фагоциты имеют три различающиеся, но взаимосвязанные функции.
Распознавание и удаление воспалительных стимулов
Мононуклеарные фагоциты обладают рядом специальных механизмов распознавания, удаления и разрушения различных стимулов, которые способны нарушать гомеостаз организма. Против инфекционных агентов фагоциты используют цитотоксические механизмы. К ним относится образование веществ, содержащих реактивный кислород (гидроксильные ионы, супероксидные радикалы и перекись водорода). Показано, что их продукция тесно связана со способностью мононуклеарных фагоцитов экспрессировать внеклеточные цитотоксические и цитоцидные свойства. Затем патогены фагоцитируются лизосомной системой клеток; комбинированное действие различных гидролизирующих ферментов этой системы приводит к эффективному разрушению поглощенного материала.
Ряд специализированных рецепторных систем мононуклеарных макрофагов облегчает
распознавание и фагоцитарное удаление стимулов воспаления. В этом процессе особо важную роль играют продукты Т- и В-лимфоцитов (рис. 31). Антитела, синтезируемые В-лимфо- цитами, связывают антигены с образованием иммунных комплексов. У мононуклеарных фагоцитов выявлено несколько (по крайней мере три) различных типов высокоаффинных рецепторов для комплекса антиген-антитело, которые обеспечивают их распознавание и удаление с помощью фагоцитоза. Поскольку они распознают Fc-фрагменты иммуноглобулинов иммунных комплексов и в некоторых случаях Fc-фрагменты свободных антител, их называют Fc-рецепторами. Другим лигандом для стимуляции фагоцитоза являются иммунные комплексы, активированные комплементом, которые связывают рецепторы для СЗЬ.
Связывание воспалительных стимулов специфическими рецепторами мононуклеарных фагоцитов инициирует процесс фагоцитоза. Фагоцитоз характеризуется инвагинацией той части плазматической мембраны, к которой присоединяется воспалительный стимул. Этот процесс опосредуется координированной деятельностью группы сократительных белков,
лейкоциты
Лимфоциты
Рис. 31. Реакции мононуклеарных фагоцитов на продукты иммунных ответов в области воспаления.
Лимфоциты, отвечающие на иммуногенные воспалительные стимулы, продуцируют лимфокины и антитела, которые формируют иммунные комплексы. Иммунные комплексы генерируют хемотаксические стимулы, привлекающие ПМН и мононуклеарные фагоциты в область воспаления. Фагоцитирующие клетки поглощают иммунные комплексы, которые затем деградируют. Чрезмерная стимуляция фагоцитирующих клеток лимфокинами или иммунными комплексами ведет к выделению ряда медиаторов воспаления, в том числе протеиназ, вызывающих разрушение тканей. Кроме того, мононуклеарные фагоциты выделяют факторы, стимулирующие активность лимфоцитов, а также пролиферацию соединительной ткани в фиброз.
|
весьма напоминающих аналогичные белки гладких мышц. В фагоцитирующих клетках, особенно на периферии цитоплазмы, содержится большое количество актина и миозина. Эти белки, как и некоторые регуляторные белки, были выделены в чистом виде из альвеолярных макрофагов. Установлено, что образование псевдоподий, формирующихся вокруг воспалительных стимулов, связано с мобилизацией ионов кальция, которые стимулируют энергозависимую сборку и функционирование сократительных белков. Окруженный псевдоподиями стимулятор фагоцитоза оказывается в вакуоли, называемой фагосомой, которая направляется к лизосомам. Все эти процессы возможны лишь при наличии интактных микротрубочек. Лизосомы макрофагов содержат большое количество разнообразных протеиназ, гликозидаз и липаз с высокой специфической активностью. Эти ферменты необходимы для быстрого внутриклеточного разрушения поглощенных веществ. Кроме фагоцитоза, моно- нуклеарные фагоциты способны к эндоцитозу жидкости (пиноцитозу), осуществляемому специфическими и неспецифическими механизмами. Установлено, что макрофаги перитонеальной полости мышей интернализируют площадь плазматических мембран (эквивалента их общей площади) каждые 35 мин; скорость значительно возрастает при стимуляции моно-нуклеарных фагоцитов воспалительными стимулами.
У мононуклеарных фагоцитов определены разнообразные эндоцитарные функции, независимые от продуктов активированных лимфоцитов. В легких альвеолярные макрофаги посредством фагоцитоза удаляют ряд токсических и инертных частиц. Длительный контакт с некоторыми веществами, такими как кремний или асбест, может привести к хроническим легочным воспалительным заболеваниям, частично опосредуемым веществами, выделяемыми макрофагами. Мононуклеарные фагоциты могут также участвовать в развитии атеросклероза. Накопление измененных липопротеинов низкой плотности в мононуклеарных фагоцитах происходит с участием специфических рецепторов и приводит к образованию пенистых клеток, нагруженных эфиром холестерина. Наличие таких клеток является характерным признаком атеросклеротических бляшек.
Непереваренные вещества остаются во вторичных лизосомах мононуклеарных фагоцитов в месте их первоначального взаимодействия
(татуировка - типичный пример); альтернативный этому вариант- миграция клеток из организма через дыхательную систему или пищеварительный тракт. Кроме того, некоторые популяции мононуклеарных фагоцитов обладают специализированными функциями, представляя воспалительный стимул в виде иммуногена клеткам лимфоидной системы. Лимфоциты отвечают на иммуноген образованием специфических веществ, а именно лимфокинов и антител, которые облегчают функцию мононуклеарных фагоцитов при последующих встречах с иммуногеном.
Презентация антигенов Т-лимфоцитам: запуск афферентного звена иммунной системы
В последние годы было установлено, что мононуклеарные фагоциты играют решающую роль в представлении иммуногена лимфоцитам. И хотя точные механизмы, лежащие в основе презентации, остаются неясными, известно, что в физиологических условиях им-муноген связан с мононуклеарными фагоцитами и что между клеткой, несущей иммуно-ген, и лимфоцитом возникает прямой физический контакт.
На рис. 32 показана последовательность представления антигена мононуклеарными фагоцитами лимфоцитам, а также последующие события в иммунной системе. Представление антигена возможно при сингенности мононуклеарных фагоцитов и лимфоцитов. Кроме того, для представления необходима прямая или непрямая связь между иммуногеном и антигенами 1а. Показано, что антитела к антигенам 1а подавляют распознавание Т-лимфоцитами иммуногена, связанного с мононуклеарными фагоцитами.
Не все мононуклеарные фагоциты имеют на своей поверхности la-антигены; их количество зависит не только от ткани, в которой они находятся, но и от локального микроокружения в данный момент времени. Вполне вероятно, что лимфоциты, отвечающие на
представленный им антиген, могут в свою очередь увеличивать количество мононуклеарных фагоцитов, несущих la-антиген. Мононуклеарные фагоциты осуществляют также генетический контроль за развитием иммунного ответа. Этот контроль зависит от возможности мононуклеарных фагоцитов экспресси-ровать соответствующие la-антигены, что спо-
Лимфоиты
Комплексы Растворимые антиген - антитело г радулы
Дифференциация
Антителообразующая клети
Рис. 32. Представление мононуклеарными фагоцитами иммуногенов лимфоцитам.
собствует клональной экспансии Т- и В-лим- фоцитов для обеспечения синтеза лимфокинов и антител.
Секреторная активность мононуклеарных фагоцитов
Многогранное участие мононуклеарных фагоцитов в защите организма и в хроническом воспалении требует от них величайшей функциональной подвижности при взаимодействии с другими типами клеток, компонентами соединительной ткани и воспалительными стимулами во внеклеточной среде. В связи с этим мононуклеарные фагоциты синтезируют и сек- ретируют большое количество биологически активных медиаторов (табл. 4). Выделение таких медиаторов происходит не одновременно: они секретируются по мере выполнения тех
функций, которые необходимы мононуклеар- ным фагоцитам на данной стадии воспалительного процесса. Совершенно очевидно, что продукты секреции имеют важное значение для облегчения удаления патогенных организмов и других стимулов воспаления, а также для усиления процессов репарации и устранения возникших повреждений. Возможно, что некоторые аспекты хронических воспалительных процессов должны учитываться в связи с аберрантной секрецией различных продуктов мононуклеарных фагоцитов. Некоторые продукты секретируются мононуклеарными фагоцитами постоянно, в том числе ферменты лизо-цим и липопротеинлипаза, тогда как другие выделяются лишь при воздействии на мононуклеарные фагоциты воспалительными стимулами или продуктами иммунных реакций (рис. 33).
Таблица 4. Секреторные продукты мононуклеарных фагоцитов
Гидролитические ферменты ЛИзоцим
Нейтральные протеазы Лизосомные гидролазы Липопротеиновая липаза
Ингибиторы протеолитических ферментов а2-Макроглобулин агПротеазный ингибитор
Факторы, изменяющие клеточную пролиферацию Колониестимулирующий фактор Фактор созревания тимуса Ангиогенный фактор Стимулятор пролиферации фибробластов Интерлейкин-1 Фактор-антагонист глюкокортикоидов Фибронектин Ростовой фактор, происходящий из тромбоцитов Эритропоэтин
Факторы, нарушающие жизнеспособность инфекционных
агентов и эукариотических клеток
Перекись водорода
Гидроксильные радикалы
Интерферон
Листерицидный фактор
Белок, связывающий витамин В12
Фактор некроза опухоли
Факторы, имеющие отношение к гуморальным медиаторам воспаления
Все компоненты альтернативного пути и ранние компоненты классического пути комплемента Прокоагулянтный фактор Свертывающий фактор
Интерлейкин-1
Первоначально интерлейкин-1 был охарактеризован как секреторный продукт мононуклеарных фагоцитов с молекулярной массой 18 000 дальтон, который опосредует ряд важных биологических эффектов этих клеток (см. главу 15). Как показывают исследования in vitro, эти эффекты включают следующее: стимуляцию пролиферации тимоцитов; образование интерлейкина-2 лимфоцитами; пролиферацию фибробластов; синтез хондроцитами и синовиоцитами нейтральной протеиназы, а также простагландинов и протеиназы; синтез гепатоцитами белка острой фазы; хемотаксис лейкоцитов; резорбцию костей. In vivo интерлейкин-1 вызывает лихорадку, изменение уровней ионов металлов и повышение уровня белка острой фазы. Недавно были получены в чистом виде по крайней мере две формы человеческого интерлейкина-1 и идентифицированы два гена человека, которые кодируют молекулы, обладающие активностью интерлейкина-1.
Гидролитические ферменты
 |
|||||
Гидролитические ферменты, секретируемые мононуклеарными фагоцитами в ответ на воспалительные стимулы (иммунные комплексы, лимфокины), возможно, играют важную роль в развитии повреждений при хроническом вос-палении. Эти ферменты, включающие активатор плазминогена, эластазу и коллагеназу, вероятно, обусловливают деградацию и повреждение тканей, а также ускорение обмена соединительной ткани, что сопровождается удалением продуктов распада и заживлением зон воспаления.
Факторы клеточной пролиферации и дифференциации
Характерной чертой многих хронических воспалений является местная пролиферация тканей, связанная с очагами активированных лимфоидных клеток. Ярким примером такого процесса может служить пролиферирующий синовиальный паннус сустава при ревматоидном артрите. В подобных условиях растворимые факторы, включая интерлейкин-1 и ростовой фактор тромбоцитов, которые секрети- руются мононуклеарными фагоцитами, могут стимулировать пролиферацию как лимфоцитов (с последующим синтезом антител и лим- фокинов), так и фибробластов, впоследствии синтезирующих коллагеназу и компоненты соединительной ткани. Этому предположению соответствует наблюдение отмены гиперсенси- тивности замедленного типа веществами, избирательно токсичными для мононуклеарных фагоцитов, а также нарушения заживления ран у экспериментальных животных после введения антимакрофагальной сыворотки.
Прокоагулянты
При реакциях повышенной чувствительности замедленного типа и отторжении аллогенной ткани, а также при экспериментальном аллергическом энцефаломиелите и реакции Шварцмана часто наблюдается отложение фибрина. В недавних исследованиях показано, что образование фибрина в зонах поражения может инициироваться прокоагулянтной активностью, исходящей из мононуклеарных фагоцитов. Выделение такого прокоагулянтного фактора, по-видимому, зависит от сигнала Т-лимфоцй- тов. Мононуклеарные фагоциты могут также инициировать удаление фибрина, секретируя активатор плазминогена. Важное значение имеет тот факт, что прокоагулянтная активность является продуктом моноцитов, вновь прибывших к месту воспаления, тогда как активатор плазминогена синтезируется более дифференцированными макрофагами, которые вызревают под действием лимфокинов или других стимулов, присутствующих в очаге воспаления.
Продукты окисления арахидоновои кислоты
В фосфолипидах мононуклеарных фагоцитов содержится необычно большое количество арахидоновои кислоты, и, как выяснилось в последние годы, эти клетки обладают значительным потенциалом синтеза простагланди-нов и лейкотриенов. Их синтез усиливается при экспозиции макрофагов с воспалительными стимулами, включая иммунные комплексы. На основании этого открытия и уже известных эффектов экзогенных простагландинов (особенно серии Е), подавляющих различные эф- фекторные функции лимфоцитов, было выдвинуто предположение относительно способности простагландинов мононуклеарных фагоцитов действовать в качестве ингибиторных модуляторов функции лимфоцитов in vivo. Это предположение подтвердили клинические исследования, где было показано повышение иммунного ответа при использовании ингибиторов синтеза простагландинов (индомета- цин). Предполагается, что мононуклеарные фагоциты вносят свой вклад в опосредование повышенной чувствительности немедленного типа, поскольку они синтезируют лейкотриены В4 и С4. Известно, что лейкотриены входят в состав медленно реагирующей субстанции анафилаксии (см. главу 10).
Метаболиты кислорода
Во время метаболического взрыва, сопровождающего взаимодействие макрофагов с фагоцитируемыми и другими стимулами, образуется ряд потенциально токсичных метаболитов кислорода. Обладая исключительно короткой жизнью, они могут опосредовать некоторые важные функции, в том числе клеточно-зависимую цитотоксичность по отношению к опухолевым клеткам и инфекционным агентам, инактивацию некоторых белков (ингибитор а-1- протеиназы) и образование хемотаксических стимулов при перекисном окислении ненасыщенных жирных кислот, в частности арахидоновои кислоты.
Комплемент
Белки системы комплемента содержат более 20 молекул (см. главу 12), которые активируются по принципу каскада после взаимодействия с иммунными комплексами или же непосредственно воспалительными стимулами. Продукты активации комплемента усиливают
функцию фагоцитов, стимулируя хемотаксис и фагоцитоз, а также выделение из них медиаторов. Большое функциональное значение имеет секреция многих компонентов комплемента моноцитами периферической крови человека.
Лизировать опухолевые мишени известна давно.
Известно также, что мононуклеарные фагоциты, подобно другим клеткам системы иммунитета, могут оказывать как негативное, так и позитивное действие на рост опухоли.
Изучение мононуклеарных фагоцитов по сравнению с клетками других популяций киллерных клеток имеет сложности, обусловленные не только их функциональной и фенотипической гетерогенностью, что присуще и другим клеткам, но и их различиями в происхождении и локализации.
Объектом исследований в одних случаях являются моноциты периферической крови, в других - макрофаги, полученные в результате культивирования моноцитов (моноцитозависимые макрофаги), в третьих - резидентные макрофаги - макрофаги костного мозга и других тканей, головного мозга (клетки микроглии), печени (клетки Купфера), и в четвертых - макрофаги перитонеальной и плевральной полостей; очень редко исследуют дендритные клетки (ДК) -зависимые макрофаги.
К сложностям, обусловленным многообразием клеток, которые объединены в систему мононуклерных моноцитов, присоединяются еще трудности получения и выделения резидентных макрофагов различной локализации. Эти трудности существенно компенсируются возможностью исследования макрофагов, инфильтрирующих опухоль, что достаточно широко используют в различных экспериментах.
Нельзя не учитывать и еще одно важное обстоятельство, заключающееся в том, что оснований для заключения о полной и фенотипической идентичности этих различных мононуклерных фагоцитов нет, и это усложняет интерпретацию полученных результатов.
Взаимодействие маркофагов и опухолевых клеток
Изучение взаимодействия маркофагов и опухолевых клеток показало, что они не являются исключением и характер участия макрофагов во взаимодействии с опухолевыми клетками во многом зависит от свойств последних. Несколько неожиданным оказался еще один аспект этого взаимодействия - в отдельных случаях опухолевые клетки могут активировать макрофаги, выделяя различные стимулирующие факторы.Во многих случаях убедительные доказательства участия мононуклеарных фагоцитов в опухолевом процессе получены при изучении моноцитов и макрофагов, инфильтрирующих опухоль, а также на основании анализа эффективности различной иммунотерапии и других видов терапии. Поэтому целесообразно выделить эти два вопроса в самостоятельные разделы.
Доказательства способности мононуклеарных фагоцитов лизировать опухолевые клетки получены при исследовании различных опухолей: меланомы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, глиомы, карциномы молочной железы, желудка, кишечника, легкого, яичника и др.
Несомненно важная роль мононуклеарных фагоцитов в противоопухолевой защите во многом связана и с их способностью активно участвовать в формировании локального иммунитета. Этот хорошо известный общебиологический факт в полной мере проявляется и в борьбе с опухолевыми клетками.
Имеются доказательства того, что макрофаги занимают весьма существенное место и в борьбе с метастазами. Как известно, многие опухоли метастазируют в костный мозг. Появление отдельных опухолевых клеток, например карциномы органов желудочно-кишечного тракта, в костном мозгу может сопровождаться формированием метастазов, однако такие инвазивные клетки могут быть и уничтожены макрофагами.
Было показано, что различные изолированные клетки костного мозга человека, мышей и крыс очень быстро убивают опухолевые клетки. При последующем изучении этого в высшей степени интересного вопроса было установлено, что лизис опухолевых клеток не связан ни с резидентными макрофагами, ни с естественными киллерами (ЕК) .
Лизис в этих случаях осуществляют костномозговые гемопоэтические стволовые клетки (CD90), которые очень быстро дифференцируются в СD163-положительные клетки и осуществляют лизис как непосредственно контактируя с мишенями, так и продуцируя NO в результате активации iNOS. Из этих очень интересных данных следует, что способность гемопоэтических стволовых клеток быстро дифференцироваться в макрофаги позволяет им ограничивать экспансию микрометастазов в костный мозг. Это свидетельствует о роли макрофагов в локальной противоопухолевой защите.
Роль макрофагов в формировании локальной противоопухолевой защиты иллюстрируют и данные экспериментов с использованием внутрибрюшинного, подкожного и внутривенного введения опухолевых клеток и последующего изучения цитотоксичности клеток, изолированных из сальника.
В результате было показано, что макрофаги сальника мышей, иммунизированных как сингенными, так и аллогенными опухолями, проявляют цитотоксичность, которая предшествует цитотоксичности макрофагов перитонеальной полости, что наиболее четко проявляется в сингенной системе - факт, установленный только при внутрибрюшинном введении опухолевых клеток.
Эти данные были положены в основу гипотезы о том, что иммунологические реакции в условиях интраперитонеального введения опухолевых клеток инициируются в сальнике, что впоследствии приводит к формированию локального противоопухолевого иммунитета.
Несмотря на очевидные доказательства участия мононуклеарных фагоцитов как в системном, так и в локальном иммунологическом ответе, многое в этом вопросе остается неясным. Например, в высшей степени интересное и важное положение, высказанное S. Adamas еще 20 лет тому назад, что макрофаги выполняют различные функции на каждой стадии их активации и могут влиять на разные стадии опухолевого процесса, осталось практически не раскрытым.
С большой степенью вероятности можно говорить о том, что только при таком подходе, как учет фенотипа, локализации, функциональной активности мононуклерных фагоцитов, стадии процесса и биологии опухолевой клетки может быть внесена ясность во многие, иногда и противоречивые вопросы.
Подтверждением того, что мононуклерные фагоциты различного происхождения и локализации (а нередко и в пределах локализации в одном органе) различаются функционально и фенотипически, могут быть следующие факты.
Соответствующие данные были получены сравнительно давно, но предметом интенсивного изучения этот вопрос становится лишь в последние годы. Еще в 1987 г. было показано, что в ответ на внутрибрюшинное введение клеток липосаркомы, во-первых, резко увеличивается количество макрофагов перитонеальной полости, а во-вторых, по характеру ответа макрофагов можно выделить четыре типа: макрофаги экссудата, резидентные макрофаги, резидентные макрофаги экссудата и пероксидазонегативные макрофаги.
В последующие дни после перевивки перераспределяется состав мононуклеарных фагоцитов и увеличивается их количество в экссудате. Изучение цитотоксичности этих клеток после введения клеток липосаркомы показало, что в основном она была одинаковой, не коррелировала с каким-либо выявленным субтипом, за исключением макрофагов, негативных по пероксидазе, цитотоксичность которых различалась.
Исследование цитотоксичности альвеолярных макрофагов (лаваж) в отношении клеток рака легкого до и после лечения IFNy показало, во-первых, что сравнительно небольшой процент общего пула макрофагов проявляет цитотоксичность, а во-вторых, цитотоксичность большого количества макрофагов не активировалась IFNy и лишь небольшой процент макрофагов независимо от активации IFNy лизировал опухолевые клетки и этот лизис был опосредован выделением TNFa и NO. Все приведенные факты свидетельствуют о гетерогенности популяции альвеолярных макрофагов.
Сравнительная оценка цитотоксического и цитостатического действия мононуклеарных фагоцитов асцитической жидкости и моноцитов периферической крови больных раком легкого показала следуюидее. В асцитической жидкости было больше клеток с фенотипом CD14brightCD16+, чем в крови, большее количество клеток, экспрессирующих HLA-DR, а обработка IFNy активировала как цитостатическое, так и цитотоксическое действие именно CD14brightCD165+ макрофагов асцитической жидкости.
Зависимость характера влияния мононуклеарных фагоцитов от локализации очень наглядно иллюстрируют опыты с изучением микроглии - макрофагов головного мозга, инфильтрирующих глиому, которая, как известно, относится к высокоагрессивным опухолям.
Исследования показали, что основным хемоаттрактантом, который обеспечивает инфильтрацию глиомы крыс, является МСР-1. В опытах in vitro МСР-1 не влиял на рост опухоли, однако интрацеребральная трансфекция гена МСР-1 усиливала рост глиомы CNS-1 in vivo. Из этого следует вывод авторов о том, что МСР-1 необходим клеткам микроглии для их привлечения к глиоме, что в большей степени сопровождается усилением роста глиомы, чем ее ингибицией.
Приведенные данные наглядно показывают, что локализация мононуклеарных моноцитов отражается на их функциональной активности, фенотипе и интенсивности ответа на стимуляцияю IFNy.
В высшей степени интересным и важным представляется вопрос о том, каким образом биологические особенности опухолевых клеток влияют на макрофаги (супрессирующее влияние будет рассмотрено в третьей части монографии).
Исследование цитотоксичности перитонеальных макрофагов хомячков в отношении клеток двух линий меланомы (пигментной и безпигментной) показало, что макрофаги осуществляли лизис клеток безпигментной меланомы, что сопровождалось увеличением продукции IL-10 и NO. Подобный эффект не зарегистрирован в отношении клеток пигментной меланомы. Было также показано, что особенности меланомы определяют и ее чувствительность к TNFa и IL-6.
Много фактов, свидетельствующих о противоопухолевом эффекте NO, получены I. Fidler и соавторами.
В частности, показано, что, во-первых, трансфекция гена iNOS в опухолевые клетки рака почек может снижать количество метастазов, во-вторых, показана обратная корреляция между продукцией эндогенного NO и способностью клеток меланомы линии К-1735 к выживаемости (у сингенных мышей) и развитию метастазов.
Далее, изучение клеток различных линий меланом относительно их чувствительности к макрофагам под влиянием TGFP показало, что макрофаги лизируют клетки различных линий, однако наибольшей чувствительностью отличаются клетки линии B16BL6, в меньшей степени - B16F10 и еще меньше - B16F1. Таким образом, есть основания говорить о разной чувствительности, в частности клеток меланомы к лизису макрофагами. Выяснение причин такой неодинаковой чувствительности представляется весьма важным.
Чувствительность клеток к действию макрофагов
Заслуживают внимания и данные о динамике чувствительности нормальных мезотелиальных клеток и клеток мезотелиомы к действию макрофагов. Оказалось, что нормальные нетрансформированные клетки линий IAR-2 и Rat-1 были мало чувствительны к действию макрофагов; такая чувствительность была еще меньше выражена у трансформированных клеток.Некоторые опухолевые клетки могут экспрессировать хемокины и их рецепторы. Изучение последних на клетках различных форм рака желудка (диффузная и интестициальная) показало, что эти клетки различаются по характеру экспрессии хемокинов. Клетки обоих форм экспрессировали CXCL-8 (IL-8) с превалированием на клетках диффузной формы рака; CXCL-1 - исключительно клетки диффузной формы (опухолевые клетки экспрессировали и рецепторы хемокинов), а перитуморальные макрофаги - CXCL-10 и CXCL-9 - хемоаттрактанты для Т-лимфоцитов.
Объяснением этих фактов может служить то, что взаимодействие опухолевых клеток с инфильтрирующими макрофагами индуцирует различные сигналы как в опухолевых клетках, так и в макрофагах. Такие сигналы могут активировать опухолевые клетки, которые приобретают способность выполнять роль хемоаттрактантов.
В связи с этим становится понятным, почему высокую инвазивность приобретают именно клетки диффузного рака, которые практически постоянно экспрессируют CD8 и CXCL-1. Полученные данные позволяют предположить, что взаимодействие различных опухолевых клеток и макрофагов может иметь различные последствия.
Более того, при взаимодействии макрофагов и опухолевых клеток экспрессия мРНК IL-8 наблюдалась исключительно в опухолевых клетках, что очень убедительно показано при исследовании макрофагов, инфильтрирующих ткань немелкоклеточного рака легкого человека; повышение уровня экспрессии в определенной степени связано с активацией NF-kappaB, которая увеличивается как в макрофагах, так и в опухолевых клетках.
Особого внимания не только из-за своей новизны, но и вследствие неординарности результатов заслуживают данные экспериментов, из которых следует, что в ряде случаев опухолевые клетки могут индуцировать активность макрофагов. На модели глиомы было показано, что IFNP усиливает цитотоксичность макрофагов против клеток глиомы.
Наряду с этим сокультивирование клеток глиомы с макрофагами позволяет выявить, что опухолевые клетки выделяют фактор, усиливающий цитотоксичность макрофагов. Не менее впечатляющими являются и данные о том, что сокультивирование различных опухолевых клеток (рак кишечника, матки) с макрофагами in vitro активирует макрофаги и это сопровождается не только увеличением продукции TRAIL, но и усилением экспрессии рецепторов смерти (DR-4 и DR-5) опухолевыми клетками.
Нетрадиционными представляются и следующие данные. Уже отмечалось, что для привлечения макрофагов к участку развития опухоли, так же, как и других клеток, необходимо наличие хемоаттрактантов.
Оказалось, что трансфекция гена GM-CSF в клетки карциномы кишечника KM12SM сопровождается накоплением макрофагов и нейтрофилов - результат секреции хемоаттрактанта макрофагов МСР-1, который усиливает привлечение мононуклеарных клеток, экспрессию адгезивных молекул макрофагами и усиление контактзависимого лизиса опухолевых клеток.
Изучение взаимодействия опухолевых клеток и мононуклеарных фагоцитов (моноциты и моноцитозависимые макрофаги) на специально разработанной для этой цели модели дало возможность выявить, что такое совместное культивирование изменяет некоторые фенотипиче-ские особенности как опухолевых клеток, так и мононуклеарных фагоцитов. На моноцитах повышается уровень экспрессии CD16 (FcyRIII), CD54, CD68 и CD86, на некоторых опухолевых клетках - CD11a, CD58 и на всех взаимодействующих клетках - TNFaRII и HLA-DR (рис. 27).
Рис. 27. Изменение фенотипических особенностей макрофагов/моноцитов и опухолевых клеток при их совместном культивировании
Аналогичные изменения наблюдали и на моноцитозависимых макрофагах, однако при этом имели место и некоторые отличия, которые проявлялись в том, что только контакт с моноцитами (но не с моноцитозависимыми макрофагами) сопровождался усилением Fas/FasL взаимодействия.
Эти данные указывают не только на возможность модификации иммунофенотипа, как мононуклеарных фагоцитов, так и опухолевых клеток в условиях их взаимодействия, но и еще раз подтверждают, что полной идентичности фенотипических особенностей мононуклеарных фагоцитов различной локализации нет.
Следует обратить внимание еще на один факт, который имеет важное значение для проведения работ на разных экспериментальных моделях опухолевого процесса с использованием мышей различных линий, так как установлено, что макрофаги мышей различных линий различаются по способности продуцировать Н2O2 и метаболиты арахидоновой кислоты.
А именно: макрофаги мышей линии SENAR более чувствительны к действию канцерогенов, в частности химических, и выделяют значительно меньше указанных продуктов, чем
Министерство
здравоохранения социального
развития РФ
Волгоградский
государственный медицинский
университет
Кафедра
гистологии, эмбриологии,
цитологии
Зав. каф.
д.м.н. профессор М.Ю.
Капитонова
Самостоятельная
работа студента.
«Система
мононуклеарных фагоцитов
в организме человека»
- Выполнил:
- Студент
I курса 4 группы
- Медико-биологического
факультета
- Никулин
Д.А.
- Проверил:
Загребин В. Л.
Содержание
Введение………………………………………………………… ……..…2
1.
Фагоциты………………………………………………………… …….3
2.
Моноциты………………………………………………………… ……5
3.
Макрофаги……………………………………………………… ……...6
3.1
Макрофаги: общие сведения
……………………………………7
3.2
Макрофаги: роль в инициации
клеточного иммунитета..11
3.3
Макрофаги: роль в иммунологическом
процессе ……….13
4.
Моноциты и фагоциты:
патология……………………………..14
5.Клетки
Купфера в печени………………………………………….16
6.Макрофаги
селезёнки…………………………………………….... 18
7.
Система мононуклеарных
фагоцитов ……………................19
7.1
Распознавание и представление
антигенов макрофагами………………………………………………… …………21
7.1.1
Нейтрофилы…………………………………………………… ..23
7.1.2
Базофилы………………………………………………………… 25
7.1.3
Эозинофилы…………………………………………………… ..27
Заключение…………………………………………………… ………..29
Литература…………………………………………………… …………31
Введение
Ретикулоэндотелиальная
система, макрофагическая система, совокупность
клеток мезенхимного происхождения, объединяемых
на основе способности к фагоцитозу; свойственна
позвоночным животным и человеку. К РЭС
относят клетки ретикулярной ткани, эндотелия
синусоидов (расширенных капилляров) кроветворных
и др. органов, а также все виды макрофагов,
объединяемых на основании общего происхождения
из стволовой кроветворной клетки в систему
мононуклеарных (одноядерных) фагоцитов.
Выполняет защитную функцию, играет существ,
роль во внутр. обмене веществ организма.
Система мононуклеарных
фагоцитов (греч. monox один + лат. nucleos ядро:
греч. рhagos пожирающий, поглощающий + гистол.
суtus клетка; синоним: макрофагальная система,
моноцитарно-макрофагальная система)
- физиологическая защитная система клеток,
обладающих способностью поглощать и
переваривать чужеродный материал. Клетки,
входящие в состав этой системы, имеют
общее происхождение, характеризуются
морфологическим и функциональным сходством
и присутствуют во всех тканях организма.
- 1.
Фагоциты
Фагоциты человека и других животных называют «профессиональными» или «непрофессиональными» в зависимости от того, насколько эффективно они фагоцитируют. К профессиональным фагоцитам относятся нейтрофилы, моноциты, макрофаги, дендритные клетки и тучные клетки. Основное отличие профессиональных фагоцитов от непрофессиональных в том, что профессиональные имеют молекулы, называемые рецепторы, на своей поверхности, которые обнаруживают чужеродные объекты, например бактерии. Один литр крови взрослого человека в норме содержит около 2,5-7,5 млрд нейтрофилов, 200-900 млн моноцитов.
При инфекции химические сигналы привлекают фагоциты к месту, где патоген проник в организм. Эти сигналы могут исходить от бактерий или от других фагоцитов, уже присутствующих там. Фагоциты перемещаются путём хемотаксиса. Когда фагоциты контактируют с бактериями, рецепторы на их поверхности связываются с ними. Эта связь приводит к поглощению бактерий фагоцитами. Некоторые фагоциты убивают проникших патогенов с помощью оксидантов и оксида азота. После фагоцитоза, макрофаги и дендритные клетки могут также участвовать в презентации антигена - процессе, при котором фагоциты перемещают патогенный материал обратно на свою поверхность. Этот материал затем отображается (презентируется) для других клеток иммунной системы. Некоторые фагоциты поступают в лимфатические узлы и презентируют материал лимфоцитам. Этот процесс важен в формировании иммунитета. Тем не менее, многие болезнетворные микроорганизмы устойчивы к атакам фагоцитов.
2.
Моноциты
Моноциты
- это
лейкоциты
, не содержащие
гранул. Их диаметр в
сухом
мазке
составляет
12 - 20 мкм. На долю моноцитов приходится
4 - 8% всех лейкоцитов крови (примерно 450
клеток в 1 мкл). Моноциты образуются в
костном мозге
,
а не в
ретикулоэндотелиальной
системе
,
как считалось ранее. В кровь выходят не
окончательно созревшие клетки, которые
обладают самой высокой способностью
к
фагоцитозу
. Моноциты, выходя
из кровяного русла, становятся
макрофагами
,
которые наряду с
нейтрофилами
являются главными
"профессиональными фагоцитами".
Макрофаги, однако, значительно больше
по размерам и дольше живут, чем нейтрофилы.
Клетки-предшественицы макрофагов - моноциты,
выйдя из
костного
мозга
, в
течение нескольких суток циркулируют
в крови, а затем мигрируют в ткани и растут
там. В это время в них увеличивается содержание
лизосом
и
митохондрий
. Достигнув зрелости,
моноциты превращаются в неподвижные
клетки -
гистоциты
, или тканевые макрофаги.
Вблизи
воспалительного
очага
они
могут размножаться делением. Они образуют
отграничивающий вал вокруг инородных
тел, которые не могут быть разрушены.
Эти клетки всегда присутствуют в больших
количествах в
лимфатических
узлах
, стенках
альвеол
и синусах
печени
,
селезенки
и
костного
мозга
. Моноциты
также являются предшественниками
клеток Лангерганса
,
клеток микроглии
и других
клеток, способных к переработке
и представлению антигена
.
В отличие от В - и Т-лимфоцитов, макрофаги
и моноциты не способны к специфическому
распознаванию антигена.
3.
Макрофаги
Макрофаги
- клетки системы мононуклеарных фагоцитов
(до 15-80 мкм). Образуются из моноцитов крови.
Обладают фагоцитарной, секреторной и
регуляторной активностью. Способны перерабатывать
и презентировать чужеродный антиген.
Мигрируют
в различные ткани. Локальные факторы
существенно влияют на их морфологию и
функциональную специализацию. Различают
альвеолярные, перитонеальные, соединительнотканные,
Купферовские клетки печени, остеокласты
костной ткани, микроглиальные клетки
ЦНС, многоядерные гигантские клетки гранулемы
(клетки Микулича).
Макрофаги
- долгоживущие клетки, играющие важную
роль в формировании естественного и приобретенного
иммунитета. Они синтезируют цитокины
(ИЛ-1, ФИО, ИЛ-12) и белки комплемента. На
их мембране локализуются диференцировочные
поверхностные маркеры: молекула CD 14 -
рецептор для ЛПС; молекула CD35 - рецептор
для C3b фрагмента комплемента; CD11b/CD18 (LFA-1)
- адгезивные молекулы; CD64 (FcR1) - рецептор
Fc-фрагмента иммуноглобулинов; CD4 антиген
- корецептор; HLA-DR молекулы распознавания
II класса.
Табл.
Основные функции макрофагов
T-лимфоциты
распознают инфицированный макрофаг по
экспонированию на его поверхности микробного
антигена, находящегося в комплексе с
гликопротеином MHC класса II, который
в данном случае служит сигналом макрофага.
В результате распознавания T-клетки выделяютлимфокины,
стимулирующие внутриклеточное уничтожение
возбудителя макрофагом.
В
отличие от лимфоцитов, макрофаги не обладают
способностью специфичного узнавания.
Кроме того, макрофаги, по-видимому, отвечают
за индукцию толерантности.
При
аутоиммунных заболеваниях макрофаги
удаляют из крови иммунные комплексы
и другие иммунологически активные вещества.
Макрофаги
участвуют в заживлении ран, удалении
отживших клеток и образовании
атеросклеротических бляшек.
3.2
Макрофаги: роль в инициации
клеточного иммунитета
Макрофаги
помимо участия в реакциях неспецифического
иммунитета проявляют себя и в реакциях
специфической иммунной защиты от инфекции
в качестве антигенпрезентирующих клеток.
В
процессе активации T-лимфоцитов, клетки,
представляющие антиген в иммуногенной
форме на своей поверхности (антигенпрезентирующие
клетки), должны обладать, по крайней мере,
двумя основными свойствами:
-
способностью образовывать комплекс антигенного
пептида с молекулами I или II классов
МНС, что является первым сигналом к пролиферации
и дифференцировке наивных T-клеток, и
-
экспрессировать костимуляторы, обеспечивающие
прохождение второго сигнала
активации Т-клеток.
Макрофаги
в состоянии покоя обладают очень незначительным
количеством молекул MHC II класса и полностью
лишены костимулятора В7 на своей поверхности.
Выраженное представительство этих молекул
на мембране макрофага начинается после
захвата и внутриклеточного переваривания
микроорганизмов.
Один
из способов поглощения бактерий связан
с рецепторами к маннозе, которые
способны взаимодействовать с углеводами
бактериальной стенки. Захваченные микроорганизмы
деградируют в фаголизосомах,
образуя отдельные пептиды, которые выносятся
на клеточную поверхность в комплексе
с молекулами MHC.
Именно
в процессе внутриклеточного переваривания
корпускулярого антигена происходит
индукция синтеза и экспрессии на клеточной
поверхности молекул MHC класса II и костимулятора
В7. Факторами индукции, возможно, являются
рецепторы клеточной поверхности, взаимодействующие
с микроорганизмами, поскольку синтез
В7 можно индуцировать простой инкубацией
макрофагов с отдельными компонентами
(углеводами, липополисахаридами) бактериальной
стенки.
Индукция
костимулирующей активности к общим микробным
компонентам позволяет иммунной системе
отличать бактериальные антигены от собственных
антигенов организма или безвредных, хотя
и чужеродных белков. Из практической
работы известно, что получение иммунного
ответа к некоторым белкам возможно только
с использованием адъювантов,
включающих убитые микроорганизмы или
продукты их бактериальной стенки. Схема
возможных отношений в данном случае выглядит
следующим образом.
Если
белковые антигены захватываются и презентируются
макрофагами в отсутствие бактериальных
компонентов, которые инициируют синтез
В7, то Т-клетка специфически распознает
антиген, однако остается рефрактерной,
так как отсутствует действие второго
сигнала для запуска пролиферации и дифференцировки.
Внесение в систему бактериальных компонентов
- индукторов костимулятора В7 - обеспечивает
полноценное включение в иммунный ответ
Т-клеток. В условиях эксперимента аутоиммунное
заболевание легко индуцируется смесью
собственных тканевых антигенов с компонентами
бактериальной стенки, иллюстрируя тем
самым значение костимуляции в процессе
разграничения "своего" от "чужого".
Понимание
того факта, что запуск Т-клеточного ответа
связан с двухсигнальной системой активации,
внесло ясность в работу макрофагов в
качестве "мусорщиков". Купферовские
клетки печени и макрофаги селезенки постоянно
захватывают и разрушают отжившие клетки
этих органов. При этом в отсутствие бактериальных
стимуляторов экспрессируемые на поверхности
фагоцитирующих клеток собственные антигены
как результат деградации захваченных
отживших клеток не в состоянии развить
аутоиммунный ответ.
В
представленных примерах иммуногенность
связана не со структурными особенностями
антигена, а с реактивностью организма,
с потенциальными возможностями его иммунокомпетентных
клеток.
3.3
Макрофаги: роль в иммунологическом
надзоре
В
опытах in vitro установлено, что макрофаги,
активированные цитокинами
Т-клеток, оказывают
определенное противоопухолевое действие.
Оно может быть связано как с явлением
прямого фагоцитоза опухолевых клеток,
так и с процессом, опосредованным ФНО-альфа,
секретируемым фагоцитирующими мононуклеарами.
Какого-либо
бесспорного доказательства противоопухолевой
активности макрофагов in vivo пока не получено.
5.
Клетки Купфера в печени
Наибольшее
количество тканевых макрофагов находится
в печени. Купферовские клетки печени
являются типичными фагоцитами и имеют
решающее значение для реализации фагоцитарной
функции организма в целом. По литературным
данным, от 85 до 95% внутрисосудистого фагоцитарного
клиренса является функцией макрофагов
печени (Зубовский Г.А. 1978; Маянский Д.Н.
1992). Фагоцитарная функция Купферовских
клеток печени в значительной степени
зависит от параметров печеночного кровотока.
Развитие портокавальных анастомозов
приводит к транзиту крови из воротной
вены в нижнюю полую вену, минуя печень
и снижая, таким образом, количество фагоцитированных
частиц. Без учета изменений параметром
печеночного кровотока невозможно достоверно
оценить функцию печеночных макрофагов.
Известные
методики определения печеночного кровотока
с помощью меченых соединений основаны
на принципах разведения недиффундирующего
индикатора, проходящего через печень
(Джилмукашев У.К. 1983, 2000; Георгиеску Б.
и Брасле Б. 1967). Недостатком этих методик
является, во-первых: неполная оценка величины
портокавальных анастомозов, т.к. авторами
не разделяются селезеночная и кишечная
составляющие портального кровотока,
во-вторых, невозможность оценить нарушения
функции ретикулоэндотелиальной системы
печени.
Методики
определения функции ретикулоэндотелиальных
клеток печени основаны на способностикупферовских
клеток фагоцитировать коллоидные частицы,
приходящие через орган. Получаемые при
этом результаты отмечают не истинное
поражения ретикулоэндотелия, а некий
усредненный параметр, состоящий, как
минимум, из трех составляющих: нарушения
портального кровотока и развитие портокавальныханастомозов;
нарушение структуры печеночного ацинуса
и, как следствие, снижение кровотока в
синусах; и собственно поражение или уменьшение
количества купферовских клеток. Причем
доля первой из вышеперечисленных составляющих
значительно превышает остальные. Решающее
значение при этом имеет не истинное поражение
печеночного ретикулоэндотелия, а изменение
печеночного и портальногокровотоков.
При
исследовании макрофагальной активности
органов и тканей необходимо учитывать
влияние изменениягемодинамики и функции
ретикулоэндотелиальной системы печени,
что обусловлено тесной взаимосвязью
процессов нарушения кровотока, изменения
архитектоники и поражения печеночных
клеток.
Радионуклидная
диагностика гемодинамики печени и активности
системы мононуклеарных фагоцитов позволяет
определить наличие и величину портокавальных
анастомозов и исключить влияние изменения
печеночного и портального кровотоков
при проведении исследования функции
СМФ.
6.
Макрофаги селезёнки
Селезенка
- вторичный паренхиматозный орган иммунной
системы, локализующийся в левой верхней
области брюшной полости. Является главным
местом развития адаптивного иммунитета
на действие экзогенных антигенов, поступающих
в организм через кровь. Поддерживает
процесс репродуцирования иммунокомпетентных
клеток (Т- и В-лимфоцитов) в строго определенных
участках, так называемых Т- и В-зависимых
зонах.
Т-лимфоциты
в виде скоплений располагаются вокруг
артериол и образуют периваскулярные
муфты. Последние на 75 % состоят из CD4+ Т-лимфоцитов
и на 25% - из CD8+ Т-лимфоцитов. В-лимфоциты
формируют фолликулы с зародышевыми центрами
- В-зависимую зону. Этот слой селезенки
получил название белой пульпы. Артериолы
заканчиваются сосудистыми синусами,
содержащими большое количество макрофагов
и ДК (красная пульпа).
Местом развития
специфического ГИО на действие чужеродных
антигенов, поступающих с кровью, является
белая пульпа. Красная пульпа выполняет
функцию фильтра крови, улавливающего
чужеродные организму частицы и молекулы,
эритроциты, иммунные комплексы. Многие
микроорганизмы распознаются непосредственно
фагоцитами в красной пульпе. Некоторые
транспортируются в белую пульпу, где
в результате стимуляции В-лимфоцитов
образуются зародышевые центры (ЗЦ). Последние
являются местом накопления плазматических
клеток и синтеза антител. Строма красной
и белой пульпы состоит из фагоцитирующих
и перерабатывающих антиген клеток.
Ежедневно
примерно половина общего объема крови
проходит через селезенку. Макрофаги селезенки
выполняют важную функцию по распознаванию
и элиминации поврежденных и неполноценных
клеток крови.
7.
Система
мононуклеарных фагоцитов
В
систему мононуклеарных фагоцитов входят
моноциты крови и различные макрофаги
(купферовские клетки печени, альвеолярные
макрофаги, макрофаги соединительной
ткани, клетки Лангерганса, астроциты
глии, остеокласты). Все они возникают
из гемопоэтической стволовой клетки
и проходят ряд стадий: монобласт-промоноцит-моноцит- макрофаг.
Созревают
под влиянием четырех гранулоцитарно-макрофагальных
колониестимулирующих факторов (ГМ-КСФ),
выделяемых Т-лимфоцитами, фибробластами
и макрофагами. В зависимости от последующей
локализации макрофаги приобретают специфические
структурные и морфологические черты.
Они несут на поверхности маркеры: CD14,
Fc-рецепторы для иммуноглобулинов, рецепторы
для СЗ-компонента комплемента и HLA-DR антигены.
CD14 молекулы связывают липополисахариды
бактерий вместе с белком сыворотки крови,
при активации макрофагов они сбрасываются
с клетки.
Фагоциты
обладают развитым лизосомальным аппаратом,
где содержится большое количество ферментов.
Функции
макрофагов:
фагоцитоз,
распознавание и представление (презентация)
антигенов,
секреция медиаторов системы иммунитета
(монокинов).
и т.д.................
В кровеносной системе циркулирует кровь - жидкая ткань, которая выполняет ряд физиологических функций. Она состоит из плазмы, а также форменных элементов. К ним относят эритроциты, лейкоциты, тромбоциты. Стоит отметить, что лейкоциты бывают 5 типов. Это базофилы, нейтрофилы и эозинофилы, а также одноядерные клетки крови под названием мононуклеары, к которым относят лимфоциты и моноциты.
Мононуклеары в крови: общая характеристика
Как уже было отмечено, данные клетки относятся к лейкоцитам. Следует отметить, что в мононуклеарам также относят плазмоциты - это предшественники Т - и В-лимфоцитов. Мононуклеары не имеют специфической зернистости, содержат простое несегментированное ядро. Соотношение различных видов клеток крови позволяет оценивать тяжесть заболевания или определять эффективность проводимого лечения.
Лимфоциты
Если говорить о лимфоцитах, то это форменные элементы, которые отвечают за клеточный иммунитет. В них образуются антитела, которые связывают чужеродные вещества и убивают клетки собственного организма, если они заражены микроорганизмами. Кроме этого, данные мононуклеары в крови способны «узнавать» раковые клетки и разрушать их.
Моноциты
Если характеризовать моноциты, то это лейкоцитарные клетки, которые отвечают за иммунный ответ и образование цитокинов. Также эти мононуклеары в крови способны к дифференциации, поскольку являются предшественниками макрофагов. Они способны поглощать микроорганизмы и различные бактерии, поврежденные клетки и ткани вследствие воспаления.
Мононуклеары: норма
Для определения уровня лимфоцитов и моноцитов сдают развернутый анализ крови с определением лейкоцитарной формулы. В норме лимфоциты составляют 25-35 %, а моноциты - 2-6 %. Следует отметить, что у детей количество данных клеток крови несколько выше, чем у взрослых. Кроме этого, есть ряд патологий, которые также сопровождаются лимфоцитозом. Так, при инфекционных и вирусных заболеваниях, патологиях крови, отравлениях или употреблении медикаментов количество лимфоцитов может увеличиваться. Снижение их уровня наблюдается при милиарном туберкулезе, апластической анемии, печеночной недостаточности, а также при приеме цитостатиков. Количество моноцитов также колеблется при определенных патологических состояниях. Так, эти мононуклеары в крови возрастают при острых инфекциях, системных коллагенозах, заболеваниях крови, отравлениях. Снижение уровня этих клеток наблюдается при шоке, приеме глюкокортикоидов, при родах и пиогенных инфекциях.
Атипичные мононуклеары в крови
Данные клетки еще называются вироцитами. Это своеобразные лимфоциты, имеющие определенные морфологические признаки моноцитов. Считается, что вироциты - это видоизмененные Т-лимфоциты. Как правило, данные клетки обнаруживают при инфекционном мононуклеозе, хотя в отдельных случаях они появляются при других заболеваниях, но при этом составляют не более 10 %. Инфекционный мононуклеоз подтверждают, если в лейкоцитарной формуле количество атипичных мононуклеаров превышает 10%. Следует отметить, что у любого здорового человека также выявляют эти клетки, но их количество составляет не более 1/6 от числа лимфоцитов. При любой вирусной инфекции, после вакцинации, при условии наличия опухолей или аутоиммунных патологий, а также при ВИЧ-инфекции уровень атипичных мононуклеаров растет.
